 
|
NGS Kitaplığı Oluşturma GDSPure DNA Boyut Seçimi ve Temizleme Magbeads
Ürün ayrıntıları:
| Menşe yeri: | Çin |
| Marka adı: | GDSBio |
| Sertifika: | ISO9001, ISO13485 |
| Model numarası: | NC1011, NC1012, NC1013 |
Ödeme & teslimat koşulları:
| Min sipariş miktarı: | 1 kutu |
|---|---|
| Ambalaj bilgileri: | küçük paket veya toplu dağıtım veya OEM |
| Teslim süresi: | 8 iş günü |
| Ödeme koşulları: | L/C, D/A, D/P, T/T, Western Union, MoneyGram |
| Yetenek temini: | Günde 10000 Kutu/Kutu |
|
Detay Bilgi |
|||
| Stoklamak: | Evet | Kedi. HAYIR.: | NC1011, NC1012, NC1013 |
|---|---|---|---|
| Şartname: | 5ml, 60ml, 450ml | Başvuru: | Boyut seçimi ve temizleme |
| Hedef: | DNA | Logo Baskısı: | Logo Baskılı |
| Taşıma Paketi: | Paketleme | Raf ömrü: | 2 yıl |
| Depolama koşulları: | 2-8°C'de saklayın | ||
| Vurgulamak: | CE NGS Kütüphane İnşaatı,NGS Kütüphane İnşaatı Temizleme Magbeads |
||
Ürün Açıklaması
GDSPure DNA Seçim Magbeads
Kedi.No.: NC1011, NC1012, NC1013
Bileşenler
| Bileşen | NC1011 | NC1012 | NC1013 |
| GDSPure DNA Seçim Magbeads | 5 mL | 60ml | 450 mL |
Depolamak
Bu reaktif 2-8°C'de tutulmalıdır.dondurmayın.Raf ömrü açılmamışsa 2 yıldır.
Tanım
GDSPure DNA Selection Magbeads, 150 bp ila 1000 bp veya hatta daha büyük DNA parçalarını doğru şekilde saflaştırmak ve seçmek için yüksek performanslı süper paramanyetik boncuklar ve mükemmel tampon oranı kullanır.DNA kütüphanesi yapısının işleyişinde ortaya çıkan fazla nükleotidler, tuzlar, enzimler ve diğer safsızlıklar, basit yıkama işleminden sonra, dizileme, hibridizasyon, PCR ve enzim gibi aşağı akış uygulamalarında doğrudan kullanılabilen saflaştırılmış fragmanlar elde etmek için giderilecektir. sindirim.GDSPure DNA Selection Magbeads manuel ve otomatik formatlarda kullanılabilir.
Başvuru
Yeni nesil dizileme (NGS), Sanger dizileme, qPCR, ddPCR ve mikrodiziler vb. için boyut seçimi ve temizleme.
HazırlıkWönce orkTOEdeney
1. Yıkama solüsyonu: taze %80 (V/V) etanol solüsyonu
2. Eluent solüsyonu: nükleaz içermeyen su veya TE Tamponu
3. girdap
4. Manyetik raf
5. Seçim aralığının doğruluğunu sağlamak için DNA örneği hacmi ≥ 50 μL olmalıdır.
6. Deneyden önce, manyetik boncukları buzdolabından çıkarın ve kullanmadan önce 20 dakikadan fazla oda sıcaklığına ısıtın.
protokoller
Belirli Bir Boyuttan Büyük DNA Fragmanlarının Boyut Seçimi (Tek Taraflı Seçim)
1. 50 μL DNA örneğini uygun bir santrifüj tüpüne hazırlayın.
2. 1'e göre belirli bir hacimde yeniden süspanse edilmiş GDSPure DNA Selection Magbeads ekleyin.stNumuneye Tablo 1'deki Boncuk İlave oranı.Bir pipetle 10 kez hafifçe üfleyin (veya 30 saniye vorteksleyin).Örnekleri oda sıcaklığında 5 dakika inkübe edin.
Örneğin, numunede 250 bp'den büyük tüm parçaları seçmek için 40 μL (0,80X) manyetik boncuk süspansiyonu ekleyin.
3. Boncukları süpernatandan ayırmak için tüpü uygun bir manyetik rafa yerleştirin.Çözelti berrak olduğunda, süpernatantı dikkatlice çıkarın ve bir pipetle atın (boncukları atmayın).
4. Manyetik raftayken tüpe 200 µl %80 taze hazırlanmış etanol ekleyin.Oda sıcaklığında 30 saniye inkübe edin ve ardından süpernatantı dikkatlice çıkarın ve atın (boncukları rahatsız etmeyin).
5. Toplam iki yıkama için Adım 4'ü bir kez tekrarlayın.
Not: İkinci yıkamadan sonra tüm görünür sıvıyı çıkardığınızdan emin olun.
6. Tüp kapağı açıkken manyetik raftayken, manyetik boncukların yüzeyinde belirgin bir parlaklık kalmayana kadar boncukları havayla kurutun.
Not: Boncukları fazla kurutmayın, bu DNA'nın daha düşük geri kazanımına neden olabilir.Boncuklar çatlamaya başladığında çok kurudurlar.
7. Tüpü manyetik raftan çıkarın.Boncuklardan DNA hedefini 30-40 μl nükleaz içermeyen su veya TE Tamponuna elute edin.En az 10 kez yukarı ve aşağı pipetleme yaparak veya bir vorteks karıştırıcıda 30 saniye boyunca iyice karıştırın.Oda sıcaklığında 3-5 dakika inkübe edin.
8. Tüpü manyetik rafa yerleştirin.5 dakika sonra (veya solüsyon berraklaştığında), süpernatantı yeni bir tüpe aktarın.Seçim tamamlanır ve seçilen DNA sonraki deneyler için kullanılabilir veya -20°C'de uzun süre saklanabilir.
DNA Fragmanlarının Belirli Boyut Aralıklarında Boyut Seçimi (Çift Taraflı Seçim)
1. 50 μL DNA örneğini uygun bir santrifüj tüpüne hazırlayın ve A olarak etiketleyin.
2. 1'e göre belirli bir hacimde yeniden süspanse edilmiş GDSPure DNA Selection Magbeads ekleyin.stTüp A'ya Tablo 1'deki Boncuk Ekleme oranı. Bir pipetle 10 kez hafifçe üfleyin (veya 30 s vorteksleyin).Örnekleri oda sıcaklığında 5 dakika inkübe edin.
Örneğin, numunede yaklaşık 250 bp'lik parçaları seçmek için 40 μL (0,80X) manyetik boncuk süspansiyonu ekleyin.
- Boncukları süpernatandan ayırmak için tüp A'yı uygun bir manyetik rafa yerleştirin.Çözelti berraklaştığında, süpernatantı yeni bir tüpe dikkatlice alın ve B olarak etiketleyin. Boncukları atın.
4. 2'ye göre belirli bir hacimde manyetik boncuk süspansiyonu ekleyin.ndTüp B'ye Tablo 1'deki Boncuk Ekleme oranı. Bir pipetle 10 kez (veya 30 s vorteks) hafifçe üfleyin.Örnekleri oda sıcaklığında 5 dakika inkübe edin.
Örneğin, numunede yaklaşık 250 bp'lik parçaları seçmek için 10 μL (0,20X) manyetik boncuk süspansiyonu ekleyin.
5. Tüp B'yi manyetik rafa yerleştirin.Çözelti berrak olduğunda, süpernatantı dikkatlice çıkarın ve atın.
6. Manyetik raftayken tüp B'ye 200 µl %80 taze hazırlanmış etanol ekleyin.Oda sıcaklığında 30 saniye inkübe edin ve ardından süpernatantı dikkatlice çıkarın ve atın (boncukları rahatsız etmeyin).
7. Toplam iki yıkama için Adım 6'yı bir kez tekrarlayın.
Not: İkinci yıkamadan sonra tüm görünür sıvıyı çıkardığınızdan emin olun.
8. Tüp kapak açıkken manyetik raftayken, manyetik boncukların yüzeyinde belirgin bir parlaklık kalmayana kadar boncukları havayla kurutun.
Not: Boncukları fazla kurutmayın, bu DNA'nın daha düşük geri kazanımına neden olabilir.Boncuklar çatlamaya başladığında çok kurudurlar.
9. Tüp B'yi manyetik raftan çıkarın.Boncuklardan DNA hedefini 30-40 μl nükleaz içermeyen su veya TE Tamponuna elute edin.En az 10 kez yukarı ve aşağı pipetleme yaparak veya bir vorteks karıştırıcıda 30 saniye boyunca iyice karıştırın.Oda sıcaklığında 3-5 dakika inkübe edin.
10. Tüp B'yi manyetik rafa yerleştirin.5 dakika sonra (veya solüsyon berraklaştığında), süpernatantı yeni bir tüpe aktarın.Seçim tamamlanır ve seçilen DNA sonraki deneyler için kullanılabilir veya -20°C'de uzun süre saklanabilir.
Tablo 1: Boyut Seçimi için Önerilen Koşullar
| AyaklaşıkSben | 200 puan | 250 puan | 300 puan | 400 puan | 500 puan | 600 puan | 700 puan | |
| Boncuk Oranı | 1stBoncuk Ekleme | 0.90X | 0.80X | 0,70X | 0,60X | 0,55X | 0,50X | 0,45X |
| 2ndBoncuk Ekleme | 0,50X | 0,20X | 0,20X | 0,20X | 0,15X | 0,15X | 0,15X | |
notlar
1. Lütfen kullanmadan önce talimatları dikkatlice okuyun ve talimatlara göre çalıştırın.
2. Elüsyon etkinliğini sağlamak için santrifüj tüpündeki etanol elüsyondan önce mümkün olduğunca uzaklaştırılmalıdır.
3. Eluent hacmi, deneysel gereksinimlere göre ayarlanabilir, ancak 20 μL'den az olamaz.
4. Manyetik boncuklar santrifüjleme, dondurma ve diğer işlemlerden kaçınmalıdır.Boncuk süspansiyonu kullanımdan önce girdap ve diğer yöntemlerle tamamen karıştırılabilir ve oda sıcaklığına ısınması için 20 dakikadan fazla bekletilebilir.
5. DNA kaybını azaltmak için vorteks ve pipetleme işlemi sırasında sıvının tüp kapağında asılı kalmasını önleyin.
GDSBio, kaliteli yaşam bilimi ürünlerinin geliştirilmesi, üretimi ve pazarlanmasına odaklanmış bir yüksek teknoloji şirketidir.Şirket, sıradan PCR, floresan kantitatif PCR, NGS kitaplığı yapımı, nükleik asit elektroforezi ve diğer moleküler biyoloji teknolojilerine odaklanan, çekirdek olarak PCR teknolojisi ile eksiksiz bir ürün yelpazesine sahiptir ve moleküler in vitro teşhis ham moleküler bilimsel araştırma reaktifleri geliştirmiştir. malzemeler, nükleik asit ekstraksiyon ve tespit reaktifleri ve diğer ürünler.
