 |
Altın Ters Transkriptaz PCR Reaktifleri R3001 2000U
Ürün ayrıntıları:
| Menşe yeri: | Çin |
| Marka adı: | GDSBio |
| Sertifika: | / |
| Model numarası: | R3001 |
Ödeme & teslimat koşulları:
| Min sipariş miktarı: | 1 çanta |
|---|---|
| Ambalaj bilgileri: | küçük paket veya toplu dağıtım veya OEM |
| Teslim süresi: | 8 iş günü |
| Ödeme koşulları: | L/C, D/A, D/P, T/T, Western Union, MoneyGram |
| Yetenek temini: | Günde 100 Çanta/Çanta |
|
Detay Bilgi |
|||
| Kedi. HAYIR.: | R3001 | Konsantrasyon: | 2.000U |
|---|---|---|---|
| Dış görünüş: | renksiz | Grup: | Ters Transkriptaz PCR Reaktifleri |
| Aktivite: | Geçmek | Amplifikasyon yeteneği: | / |
| Logo Baskısı: | Logo Baskılı | Taşıma Paketi: | Paketleme |
| Üretim kapasitesi: | Günde 100 Çanta/Çanta | Depolama koşulları: | -20°C'de saklayın |
| Vurgulamak: | Altın Ters Transkriptaz PCR Reaktifleri,Ters Transkriptaz PCR Reaktifleri 2000U,2000U ters transkriptaz |
||
Ürün Açıklaması
Altın Ters Transkriptaz R3001(2.000U)
Geski Ters Transkriptaz
Sadece araştırma amaçlı
Bileşenler
| Bileşen | R3001 (2,000 Ü) | R3002(10,000 Ü) |
| 5 × Altın Tampon | 100 ul | 500 ul |
| Altın Ters Transkriptaz (200 U/μl) | 10 ul | 50 ul |
Depolamak
Bu reaktif -30~15°C'de tutulmalıdır.
Tanım
Altın Ters Transkriptaz, tarafından elde edilen yeni bir ters transkriptazdır.laboratuvar ortamındaM-MLV (RNaz H-) Ters Transkriptazı temel alan moleküler evrim.cDNA'nın birinci ipliği 37~55°C'de sentezlenebilir.Altın Ters Transkriptaz, karmaşık ikincil yapıya sahip RNA şablonlarının ters transkripsiyonu için çok uygun olan duyarlılığı, özgüllüğü, termal kararlılığı ve yarı ömrü daha da önemli ölçüde iyileştirmiştir.Altın Ters Transkriptaz, uzun cDNA'nın sentezi ve yüksek oranda tam uzunlukta cDNA kitaplığının oluşturulması için kullanılabilen daha güçlü polimerizasyon ve uzatma yeteneğine sahiptir.
sensirkeDtanım
Şablon/primer olarak Poly (rA)·Oligo (dT) kullanıldı.37°C'de 10 dakika, asitte çözünmeyen bir madde olarak 1 nmol dTTP'yi eklemek için gereken enzim miktarı, 1 birim aktivite (U) olarak tanımlandı.
QkaliteCkontrol
Eksonükleaz kalıntı tespiti: Bu ürünün 200 U'si ve 50 pmol tek sarmallı DNA substratı, 37°C'de 16 saat süreyle inkübe edildi ve DNA elektroforez bandı, denatürasyon PAGE elektroforezinden sonra değişmedi.
Endonükleaz kalıntısının saptanması: Bu üründen 200 U ve 0,3 μg pBR322 DNA, 37°C'de 4 saat süreyle inkübe edildi ve plazmitlerin elektroforez bantları, agaroz jel elektroforezi ile değiştirilmedi.
RNaz kalıntı tespiti: 200 U ve 1 μg 293 hücre RNA ürünü, 37°C'de 30 dakika süreyle inkübe edildi ve RNA'nın elektroforez bandı, agaroz jel elektroforezi ile değişmedi.
E. coliDNA kalıntı tespiti: 60 U'daki nükleik asit kalıntısı şu şekilde tespit edildi:E.coligDNA'ya özgü TaqMan qPCR ve kalıntısıE.coligenom 10 kopyadan azdı.
Fonksiyonel saptama 1: Ters transkripsiyon sistemine 200 U enzimi eklendi, şablon olarak 1 μg HeLa hücreleri total RNA kullanıldı, Oligo (dT)23primer olarak kullanıldı ve reaksiyon 50°C'de 45 dakika gerçekleştirildi. PCR amplifikasyonu için 1/10 cDNA ürünü alındı.VINgen.EB boyama ile agaroz jel elektroforezi, tek bir 4.6 kb bant gösterdi.
Fonksiyonel tespit 2: Ters transkripsiyon sistemine 200 U enzimi eklendi, şablon olarak 1 pg HeLa cell total RNA kullanıldı, Oligo (dT)23primer olarak kullanıldı ve reaksiyon 50°C'de 30 dakika gerçekleştirildi. PCR amplifikasyonu için 1/10 cDNA ürünü alındı.GAPDHgen.EB boyama ile agaroz jel elektroforezi, 550 bp'lik tek bir bant gösterdi.
Fonksiyonel saptama 3: Şablon olarak 500 ng HeLa hücreleri toplam RNA, Oligo (dT)23Primer olarak VN, 50°C reaksiyon için 45 dk. PCR amplifikasyonu için 1/10 cDNA ürünü alınmıştır.Polεgen.Agaroz jel elektroforezi, EB boyama, tek bir 7.1 kb (gc bakımından zengin) bant görülebilir.
ÖnemlidirNbeslemekAdikkat
RNaz kontaminasyonunu önleyin
Lütfen deney alanını temiz tutunuz. Çalışma sırasında temiz eldiven ve maske takılmalıdır.Deneyde kullanılan santrifüj tüpleri, pipetleme uçları ve diğer sarf malzemelerinde RNaz bulunmaması sağlanmalıdır.
Primer seçimiiyon
takip deneyiBenPCR
Şablon ökaryotik kökenliyse, maksimum tam uzunlukta cDNA verimi için ökaryotik mRNA'nın 3'Poly A kuyruğu ile eşleştirilmiş Oligo dT genellikle tercih edilir.
Gene spesifik primerler (GSP) en yüksek özgüllüğe sahiptir. Bununla birlikte, bazı durumlarda, PCR reaksiyonu için kullanılan GSP, cDNA'nın ilk sarmalının sentezini etkili bir şekilde yönlendiremez. Bu noktada, ters transkripsiyon, Oligo dT veya Rastgele kullanılarak yeniden yapılabilir. altıgenler.
Rastgele heksamerler en düşük özgüllüğe sahiptir ve mRNA, rRNA ve tRNA dahil olmak üzere tüm RNA, Rastgele heksamerler için şablon olarak kullanılabilir. Rastgele heksamerler, hedef bölge karmaşık bir ikincil yapıya veya yüksek bir GC içeriğine sahip olduğunda bir primer olarak kullanılabilir veya şablon prokaryotik olduğunda ve Oligo dT veya gene özgü primerlerin (GSP) kullanımı cDNA sentezini etkili bir şekilde yönlendiremediğinde.
takip deneyiBenSQPCR
Rastgele heksamerler ile karıştırılan Oligo dT, mRNA'nın her bölgesinde aynı cDNA sentezi etkinliğiyle sonuçlanarak nicel sonuçların orijinalliğini ve tekrarlanabilirliğini geliştirmeye yardımcı oldu.
Dongsheng Biotech, PCR başarısına ulaşmanıza yardımcı olacak farklı ürün serileri sunar.Enzimler için Taq Polimeraz, HS Taq DNA Polimeraz, FS Taq DNA Polimeraz, Pfu DNA Polimeraz ve Fusion Pfu DNA Polimeraz ürünümüz yüksek doğrulukta, verimli, hassas PCR performansı sağlar.Ayrıca uzun PCR performansı için Long Taq DNA Polymeraz'a sahibiz.
